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PAP(KlenTaq-S 測序酶)說明書

 更新時間:2023-06-05 點擊量:232

PAP(KlenTaq-S 測序酶)說明書

上海起發生物科技有限公司(Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.)屬于上海起發實驗試劑有限公司(2009年成立)旗下的子公司,成立的初衷是建立上海起發生物自有品牌,打造優質的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時,把好生物產業鏈中的國產生物試劑品質關。未來讓每一個和我們一樣擁有民族情懷的企業,共同創世界優秀的中國生物制造企業,圓夢中國。

產品詳情  

貨號

規格

價格

78BEA10012-250U

250U

¥870.00

78BEA10012-1250U

1250U

¥3500.00

78BEA10012-5000U

5000U

¥11300.00

78BEA10012-12500U

12500U

¥26050.00

產品詳情

KlenTaq-S 測序酶是Taq DNA 聚合酶的改造版,為 Taq DNA 聚合酶的大片段,并做了基因突變。本酶具有 5’→3’聚合酶活性,無5’→3’外切酶活性和 3’→5’外切酶活性。相比普通Taq DNA 聚合酶,KlenTaq-S 測序酶具有很強的 ddNTP 的滲入能力,因此其適用于終止法 DNA 測序或焦磷酸解反應 SNP 分析。

本公司 KlenTaq-S 測序酶是重組表達,并經多步純化制備的重組蛋白。

活性定義

活性單位指在 72℃下, 1×AM PCR Buffer 1,30 min 內將 10 nmole dNTP 摻入酸不溶性物質所需的酶量。

特點

1.尤其適合 ddNTP 等修飾核苷酸的摻入反應

2.相比全長 Taq DNA 聚合酶,本酶比活性有所降低

適用范圍

ddNTP 終止法DNA 測序(一代測序

焦磷酸解反應延伸法 SNP 分析

質量控制

經過嚴格的質控檢測,確保該產品具有最高的活性和純度。

酶貯存緩沖液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5%Tween20, and 50% glycerol.

應用舉例

以下反應舉例為 50 μl 標準 PCR 體系,僅供參考。實際 PCR 條件應根據模板、引物、目的片段大小加以優化,確定最佳反應條件。

1 按下表配制反應體系

組份 

體積/μl

終濃度 

10×AM PCR Buffer 1

5

dNTPs2.0 mM

5

0.2 mM

引物 F10 μM

1.5

0.3 μM

引物R10 μM

1.5

0.3 μM

Template

Varable*

/

KlenTaq-S測序酶(5U/μl

0.5

2.5U

ddH2O

Varable

/

總體積

50

/

*模板DNA用量參數(50 μl反應體系):

人基因組DNA100-1000 ng ; 微生物基因組DNA 10-100ng;PCR產物 1 ng-10 ng; Plasmid DNA 5-30 ng ; cDNA from RT reaction 1-5 μl 。

 

2 按如下條件進行反應,

95

2-5 min


95

15 sec

 

25-35 Cycles

55~72

20 sec

72

1kb/min

72

5 min


3 瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR 產物,或按實驗目的進行后續操作。

注意事項

1.PCR 條件和野生型 Taq DNA 聚合酶類似,對特定 DNA 的測序反應可能需要優化。

2.本酶擴增能力較野生型 Taq DNA 聚合酶有所降低,PCR 產量有所降低,不建議用于常規 PCR。

3.不可用于 Taqman 探針法 q-PCR。

 

濃度

5U/uL

運輸與保存

-20℃可保存 年,避免反復凍融


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